Что значит анализ пцр гепатит с

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL + D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке >>>

Диагностика с помощью ПЦР на гепатит С

Не все знают, для чего используют метод диагностики ПЦР на гепатит С. Одной из широко распространенных групп заболеваний являются инфекционные болезни органов желудочно-кишечного тракта. Чаще всего страдают желудок (язвы), кишечник (колиты, энтериты) и печень (гепатиты).

На печень среди всех вышеперечисленных органов возлагается наибольшая нагрузка. В организме роль печени крайне важна:

  1. Практически все реакции метаболизма протекают в печени (именно здесь образуются все виды жизненно необходимых компонентов, позволяющих организму полноценно функционировать).
  2. Печень является главным органом, осуществляющим детоксикационную функцию. С ее помощью (в частности, через желчь) производится удаление многих субстратов, способных вызвать интоксикацию и привести к тяжелым последствиям.

К сожалению, многие люди не следят за своим здоровьем, из-за чего начинает страдать печень. Обычно развиваются гепатиты различной этиологии (вирусные, токсические).

Определение гепатита

Вирусные гепатиты занимают важное место среди заболеваний печени. Тяжесть протекания заболевания, сложность лечения выносят их на первое место среди патологии другой природы этого органа.

Все гепатиты подразделяются на острые и хронические. К острым относят гепатит А и В. Среди хронических на первом месте гепатит С.

Данное заболевание вызывается вирусом гепатита С. Характерной чертой является то, что заболевание долгое время может протекать без каких-либо клинических проявлений.

Передается оно преимущественно через кровь. С током крови вирус заносится в печень, где начинает размножаться в ее клетках. В результате накопления вирионов происходит разрушение зараженного гепатоцита. В ответ на это начинают вырабатываться антитела, которые начинают атаковать остатки гепатоцитов. Из-за этого со временем нарабатывается пул против клеток печени, что усугубляет течение заболевания.

Из-за того, что болезнь протекает малосимптомно или бессимптомно, а клинические признаки появляются только при значительном поражении клеток, эта болезнь требует создания методов диагностики, позволяющих выявить ее наличие и принять соответствующие меры.

Диагностика гепатита С: качественный и количественный анализы

В настоящее время для диагностики гепатита С используются такие методы, как биопсия печени, иммунограмма.

Они позволяют непосредственно определить наличие пораженных гепатоцитов (исследование биоптата печени) или специфических антител против пораженных клеток (иммунограмма). Однако существует метод, который позволяет достоверно определить наличие самого вируса. Это ПЦР — полимеразная цепная реакция.

Суть этого метода заключается в том, что в определенных условиях происходит наработка цепей РНК. Это происходит из-за того, что в крови или исследуемом биоптате имеются фрагменты вирусной частицы. При соединении их с некоторыми молекулами в среде происходит синтез цепей, комплементарных вирусной РНК. При их последующем анализе и сопоставлении с известной нуклеотидной последовательностью вируса гепатита С удается выявить, имеется ли в организме данный вирус и присутствует ли поражение печени.

ПЦР проводится после выявления в крови специфических антител против вируса гепатита. После проведения теста выносится результат — РНК “обнаружено” или “не обнаружено”. Изредка он может гласить “недостаточно материала” — в таком случае необходим повторный анализ на гепатит С.

Если количество вирусных частиц меньше необходимого минимального количества, то можно говорить о том, что гепатита нет, а минимальные количества генетического материала могли быть “спутаны” из-за мимикрии генетического материала или некоторых последовательностей нуклеотидов, которые случайно смогли совпасть с таковой у вируса.

  1. При ПЦР отрицательный результат может наблюдаться, когда в самом деле имеются вирусные частицы в крови, однако их настолько мало (заражение произошло недавно или проведению анализа предшествовала длительная и интенсивная противовирусная терапия), что тест-система просто не смогла нормально определить их концентрацию. РНК — «не обнаружено».
  2. Если ПЦР имеет положительный результат, то вирусных частиц в крови наблюдается настолько много, что их количество превышает нижний порог чувствительности тест-системы. В этом случае высок риск развития инфекционного процесса (или он уже присутствует в довольно запущенной стадии). Обычно высокое количество вируса уже является показанием к лечению и последующей пересадке печени.

Иногда тест может становиться ложноположительным или ложноотрицательным.

Ложноотрицательный результат ПЦР гепатита наблюдается в том случае, когда в среде для проведения реакции присутствуют некоторые компоненты, которые ингибируют образование копий вирусной частицы. Из-за этого не удается получить истинной картины состояния крови, что способствует пропуску вируса и прогрессированию заболевания. На реакцию может повлиять и присутствие в крови гепарина (за счет снижения относительной вязкости крови). Неправильная интерпретация анализа возможна и тогда, когда не были соблюдены условия транспортировки и хранения исследуемого материала.

Ложноположительные результаты, когда диагностируется гепатит С, ПЦР чаще всего дает при загрязнении пробирки или рабочей среды. Кроме того, положительные результаты могут наблюдаться при наличии и вирусов гепатита других групп (за счет перекрестного реагирования).

Качественный анализ ПЦР на выявление гепатита С

Наличие в крови большого количества криоглобулинов тоже непосредственно влияет на проведение ПЦР. Из-за этого перед проведением анализа на гепатит С обязательно нужно определить в крови их концентрацию, чтобы выявить искажение результата заранее и предотвратить его.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  Анализ на гепатит в сомнительный

После проведения указанных тестов становится понятно, имеются ли в крови вирусные частицы. При их определении рекомендовано немедленно начинать противовирусную терапию с целью замедления прогрессирования процесса. В отличие от гепатита В, полного излечения от гепатита С не наблюдается; болезнь лишь переходит в латентную стадию и начинает протекать медленнее. Поражение печени при этом неизбежно. На последней стадии процесса, когда печень уже не справляется со своей функцией, может потребоваться ее трансплантация.

Лечение проводится преимущественно двумя препаратами — интерфероном и рибавирином.

Доказана их эффективность в замедлении процесса поражения гепатоцитов. Попутно обязательно назначается инфузионная терапия с целью облегчения работы печени.

Все пациенты, у которых наблюдалось увеличение количества вирусных частиц в крови, обязательно находятся на учете у гепатолога. Несколько раз в год им рекомендуется проходить профилактический осмотр с целью определения прогрессирования процесса и своевременного выявления показаний к трансплантации. Кроме того, можно использовать и гепатопротекторы, хотя мнения врачей несколько расходятся. Одни считают, что данные препараты позволяют приостановить процесс и защитить еще не пораженные гепатоциты; другие же убеждены, что толку от их приема нет и следует проводить интенсивную противовирусную терапию.

Таким образом, гепатит С относится к категории заболеваний, выявление которых составляет некоторые трудности. Совершенствование методов диагностики, а также своевременные профилактические осмотры позволят снизить частоту развития данного заболевания. Немаловажной является и профилактика данной болезни. Следует тщательно избегать контактов с кровью, отказаться от приема наркотиков, только тогда это заболевание будет искоренено. Главное в профилактике и лечении — сознательное отношение пациента к своему здоровью.

Источник: http://ogepatite.ru/c/pcr-na-gepatit-c.html

ПЦР на гепатит С

ПЦР — современная диагностика гепатита С

Вирусный гепатит С — одно из самых «коварных» заболеваний печени. Долгое время протекает бессимптомно, что приводит к хронизации процесса (в 80%). В большинстве случаев заканчивается фиброзом печени, перетекающим в цирроз или опухоль органа.

Особое значение приобретают методы ранней диагностики заболевания. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет поставить диагноз уже через несколько дней после инфицирования.

Коротко о вирусном гепатите С

Возбудитель — РНК содержащий вирус, имеющий несколько подтипов. Проникает в организм человека через кровь: половым путем, при переливании крови, инъекциях и других инвазивных медицинских манипуляциях.

Острая форма болезни не имеет значимых симптомов. Иногда отмечается тяжесть в правом подреберье, которую большинство пациентов не замечают.

Хроническая форма приводит к нарушению всех функций печени: интоксикация, боль в животе, желтуха, суставные боли и многие другие. На этом этапе процесс становится необратимым.

Часто хронический гепатит С становится предшественником злокачественного перерождения тканей печени.

Суть метода ПЦР

Методом ПЦР определяют вирусную РНК уже через 5 дней после заражения. В этот период иммунный ответ еще не запущен, результаты серологического исследования будут отрицательны, клинические симптомы полностью отсутствуют.

Именно ПЦР диагностика дает возможность поставить диагноз на ранней стадии заболевания, когда адекватное лечение значительно улучшает прогноз для больного. Различают два вида ПЦР — качественная и количественная.

Качественная методика

Обнаруживает генетический материал вируса гепатита С в минимальном количестве. Результат бывает двух видов:

  1. «Обнаружено» — положительная реакция, означающая наличие заболевания у человека.
  2. «Не обнаружено» — отрицательный анализ, который свидетельствует об отсутствии заражения или наличии вируса в таких малых количествах, которые не фиксируются данным методом. Это не дает 100% вероятности того, что вирусного гепатита С у больного нет.

Для анализа чаще всего используют кровь, но подходит и слюна, семенная жидкость, другие биологические жидкости.

ПЦР на гепатит С

Количественная методика

Это более сложный и дорогостоящий метод, который проводится по определенным показаниям:

  1. Подтверждение диагноза при положительной качественной ПЦР и обнаружении специфических антител.
  2. При сочетанной вирусной патологии (вирус гепатита С часто «соседствует» с гепатитом В, передающимся такими же способами).
  3. Контроль эффективности проводимой терапии. Для этого выясняют уровень виремии до лечения, затем на 4, 12, 24 неделе терапии. Если на 12 неделе уровень содержания вируса не снижается на две логарифмические единицы, значит препарат подобран неверно.
  4. Диагностика перехода острой стадии в хроническую.

В единице объема исследуемой жидкости (обычно в 1 мл) подсчитывают количество вирусных единиц. Результат выражается в МЕ/мл или количестве копий РНК вируса в 1 мл.

Он показывает интенсивность вирусной нагрузки на организм. Чем больше это значение, тем больше вероятность передачи вируса другим людям. Тяжесть поражения печени от уровня виремии не зависит. Для этого существуют многочисленные , так называемые, печеночные пробы.

Подготовка к исследованию

Большая часть ложноотрицательных анализов возникает из-за несоблюдения технологии проведения анализа. Чтобы избежать этого, нужно соблюдать следующие правила:

  1. Полностью исключить попадание в биоматериал загрязняющих веществ (условия абсолютной стерильности).
  2. Минимальная концентрация гепарина в крови, который используется для предотвращения свертывания или назначается больному в терапевтических целях, влияет на результат ПЦР. Важно заранее выяснить у пациента этот вопрос.
  3. Не допускать попадание любых веществ из окружающей среды, которые нейтрализуют ферменты в тест-системах ПЦР.
ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  Сколько стоит сделать анализ на гепатит в

Все эти требования касаются деятельности лаборантов и врачей. Пациенту специально готовиться не нужно. Обычно кровь сдают натощак, исключают алкоголь.

Преимущества ПЦР

В комплексном обследовании на гепатит С полимеразная цепная реакция стоит на первом месте за счет целого ряда преимуществ:

  1. Непосредственное выделение возбудителя с возможностью идентифицировать его подтип. В остальных случаях (серологические реакции) исследуют реакцию иммунной системы на вирус.
  2. Высокая специфичность методики. Вероятность получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов сведена к минимуму (в основном бывают при нарушении технологии проведения исследования).
  3. Высокая чувствительность. Большинство лабораторий и тест-систем обеспечивают чувствительность не менее 50 МЕ/мл. Существует ультра ПЦР, в которой этот показатель 10 МЕ/мл. Это означает, что вирус гепатита С можно обнаружить в первые дни инфицирования.
  4. Универсальность. Методом ПЦР выявляют сразу несколько возбудителей гепатитов при их наличии.

ВАЖНО! Вирусы с высокой изменчивостью генотипа (гепатита С, гриппа) «запутывают» иммунную систему, что приводит к нечетким показателям серологических анализов (выявляющих специфические антитела). Только ПЦР дает точный ответ о присутствии генотипа возбудителя в организме.

Трактовка результатов

ПЦР на гепатит С обычно проводится после серологических анализов на антитела. Наибольшие затруднения у пациентов вызывает трактовка количественного варианта метода. Попробуем разобраться в этом вопросе.

Если результат представлен в МЕ/мл, то результаты описываются следующим образом (данные приводятся для российского оборудования и тест-систем):

В таблице приведен вариант трактовки только для одного варианта российских тест-систем. Каждая лаборатория может использовать свое оборудование, дающее расхождение в значениях. Обычно результат выдается либо с готовой расшифровкой, либо с указание границ нормальных значений.

Особенности трактовки ПЦР

От правильной интерпретации результатов анализа зависит срок начала лечения, что в случае с гепатитом С жизненно важно для больного.

Существуют несколько факторов, влияющих на расшифровку результатов анализа:

  • Качество аппаратуры и чувствительность тест-систем. На сегодняшний день наиболее распространены Cobas Ampicolor ВГС-Теst и РеалБест РНК ВГС. Их чувствительность не менее 50 МЕ/мл. Это означает, что если вирус присутствует в меньшей концентрации (например, в первые дни инфицирования), результат исследования будет отрицательный, а заболевание будет прогрессировать без лечения. Совсем недавно появились ультра чувствительные диагностические системы (не менее 10 МЕ/мл). Они значительно повышают качество диагностики. Стоимость такой ПЦР колеблется в широких пределах — от 1800 до 10 тыс. рублей в зависимости от лаборатории.
  • Окончательный диагноз ставится только после трех разных исследований биологической жидкости. Если результат отрицательный три раза, то вируса гепатита С в организме пациента нет.
  • Для успешного лечения необходимо не только подтверждение факта заражения вирусом, но и определение его подтипа: 1а, 1в, 2а, 2в, 2с, 3, 4, 5а, 6.
  • Результаты оцениваются в двух единицах измерения: МЕ/мл и количество копий РНК/мл. Их цифры отличаются ровно в 4 раза, о чем нужно помнить, получая результаты анализа на руки.

Трактовка ПЦР реакции на вирусный гепатит С должна осуществляться специалистами. Врач разбирается в количественных показателях и сможет сравнить соответствие лабораторных результатов с клинической картиной.

Иногда бывают ложноположительные или ложноотрицательные варианты анализов, и только комплексное обследование пациента позволяет «не пропустить» это тяжелейшее заболевание печени.

ПОХОЖИЕ ЗАПИСИ:

Ваш комментарий Отменить ответ

С этим читают:

© 2018 Медицинские анализы в одном месте. Описания и расшифровка анализов.

Информация предоставляется с целью ознакомления. При первых признаках заболевания обратитесь к врачу. Имеются противопоказания, необходима консультация врача. Сайт может содержать контент, запрещенный для просмотра лицам до 18 лет. Не занимайтесь самолечением.

Источник: http://1analiz.ru/pcr-na-gepatit-s.html

ПЦР-исследование на гепатит С: виды, показания, расшифровка

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

Что такое анализ ПЦР?

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  Расширенный анализ на гепатит в

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Виды ПЦР-анализа на гепатит С

Различают три вида ПЦР-анализа:

  1. Качественный анализ ПЦР . Первая стадия исследования. Он позволяет выявить генетический материал вируса в крови.

Показания к ПЦР-анализу на гепатит С

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

  • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
  • положительный результат иммуноферментного анализа;
  • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
  • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
  • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
  • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
  • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
  • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
  • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровка ПЦР-исследования на гепатит С

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

Расшифровка качественного анализа .

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

Расшифровка количественного анализа .

Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

Расшифровка генотипирования .

Обнаружена РНК определенного генотипа

В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

Обнаружена РНК вируса гепатита С

В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

  • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
  • образец биоматериала был загрязнен;
  • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
  • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Преимущества ПЦР перед другими методами

  1. Диагностика на ранних стадиях . ПЦР обнаруживает генетический материал возбудителя заболевания. С помощью иммунофлюоресцентного анализа можно определить только иммуноглобулины — вещества, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию. В случае заражения гепатитом С промежуток между заражением и началом иммунного ответа может составлять несколько недель и месяцев, в это время ИФА будет неэффективна. ПЦР даст ответ уже на первой неделе после заражения.

Как подготовиться к сдаче крови для ПЦР-исследования

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

  • анализ крови сдают с утра;
  • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
  • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
  • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

Источник: http://hepatit.care/hepatits/gepatit-s/ptsr-issledovanie-na-gepatit-s-vidy-pokazaniya-rasshifrovka.html

Ссылка на основную публикацию